CciN I
Новосибирск
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GCGGCCGC GC↑GGCCGC
CGCCGGCG CGCCGG↓CG
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген CciN I из Curtobacterium citreus N.
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК аденовируса-2 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: Плазмидная ДНК pUC-AD
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
25 50 75 75 100 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo (E203T и E204T) прикладывается только буфер ROSE.